黃桿菌肝素酶Ⅱ重組菌培養條件的優化及高密度發酵
發布時間:2015-09-07
【作者】 周斌; 程詠梅; 鄧超; 劉衛超; 陳潮梁; 陳敬華; 許正宏;
生物工程學報 , Chinese Journal of Biotechnology,
2014年04期
【機構】 江南大學藥學院; 江南大學無錫醫學院;
【摘要】 黃桿菌肝素酶Ⅱ(HepⅡ)是一類可特異性切割肝素、硫酸乙酰肝素類分子內連接鍵的酶。文中對黃桿菌肝素酶Ⅱ重組菌的誘導時機、誘導劑添加量、誘導溫度、誘導時間等誘導產酶條件進行優化。經過優化最佳搖瓶發酵產酶條件為:37℃培養重組菌至對數生長前期,添加誘導劑IPTG至終濃度為0.3 g/L,20℃下誘導10 h,酶活達到最高,為570 U/L。在此基礎上通過發酵罐高密度培養手段將菌體濃度OD600進一步提高到98,酶活大幅度提高到9 436 U/L,該研究結果為HepⅡ的工業化生產與應用奠定了良好的基礎。