常規PCR法快速鑒別不同種屬來源的粗品肝素鈉
發布時間：2015-09-07
【作者】 陳川； 朱思宇； 李麗； 胡淑媛； 羅都強；
中國生物制品學雜志 , Chinese Journal of Biologicals,
2014年05期
【機構】 河北大學生命科學學院； 河北大學藥物化學與分子診斷省部共建教育部重點實驗室；
【摘要】 目的采用常規PCR法快速鑒別不同種屬來源的粗品肝素鈉。方法通過柱回收和膠回收兩步回收法,從粗品肝素鈉中提取動物殘留核酸,以其為模板,通過常規PCR法進行種屬來源的鑒定。分別以豬、羊來源的核酸為模板,用3種種屬特異性引物(豬、羊1、羊2)進行PCR擴增,驗證引物的特異性;對柱回收、膠回收和兩步回收法提取的核酸樣品及含不同比例(1%、5%、10%、15%)羊來源肝素鈉的混合樣品進行PCR檢測;并檢測3批次肝素鈉樣品的種屬來源。結果豬的引物能特異性擴增豬來源的核酸,羊的引物能特異性擴增羊來源的核酸;采用單一膠回收和柱回收法提取的殘留核酸,不能有效地利用常規PCR鑒定種屬來源,而兩步回收法提取的殘留核酸,能有效地利用常規PCR鑒定種屬來源;采用兩步回收法提取核酸,可檢測到含1%羊來源肝素鈉的混合樣品;3批次的肝素鈉樣品中均混有羊肝素鈉。結論常規PCR法操作簡便迅速,成本較低,可用于不同種屬來源的粗品肝素鈉的定性檢測。